Ausrüstung: Unterschied zwischen den Versionen
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<small>[[Ausrüstung:en|English]]</small> | <small>[[Ausrüstung:en|English]]</small> | ||
= Mikroskop, Kamera und Software = | = Mikroskop, Kamera und Software = | ||
*Lichtmikroskop Weso BM Pro1100 (passende Ersatzleuchte: Osram HLX 64250 Xenophot 20W 6V G4), Vergrösserung meist 400x (Okular WF 10x/Objektiv 40/0.65x) oder 600x (Okular WF 10x/Objektiv 60/0.85x)<br />[[File:Weso LM.jpg|160px]] | *Lichtmikroskop Weso BM Pro1100 (passende Ersatzleuchte: Osram HLX 64250 Xenophot 20W 6V G4), Vergrösserung meist 400x (Okular WF 10x/Objektiv 40/0.65x) oder 600x (Okular WF 10x/Objektiv 60/0.85x)<br />[[File:Weso LM.jpg|160px]] | ||
*Moticam 1000 und Moticam 5M mit MoticImages V2.0/Windows | *Moticam 1000 und Moticam 5M mit MoticImages V2.0/Windows 11 Professional 64 ->[http://www.motic.com/index.php Moticam] | ||
*Zum Wiederauffinden von interessanten Stellen im Pollenpräparat benutze ich einen [https://www.graticulesoptics.com/products/stage-micrometers-calibration-scales-grids/coordinate-graticules/s7-england-finder Pyser S7 England Finder].<br />[[File:Pyser.jpg|75px]] | *Zum Wiederauffinden von interessanten Stellen im Pollenpräparat benutze ich einen [https://www.graticulesoptics.com/products/stage-micrometers-calibration-scales-grids/coordinate-graticules/s7-england-finder Pyser S7 England Finder].<br />[[File:Pyser.jpg|75px]] | ||
*CombineZP, Image Stacking Software by Alan Hadley ->[ | *CombineZP, Image Stacking Software by Alan Hadley ->[https://alan-hadley.software.informer.com/ Download] | ||
*Picolay Image Stacking Software by Heribert Cypionka ->[http://www.picolay.de/ Homepage] | *Picolay Image Stacking Software by Heribert Cypionka ->[http://www.picolay.de/ Homepage] | ||
*Statistische Auswertung der gesammelten Daten mit dem Excel-AddIn [http://www.winstat.de/ WinStat] | *Statistische Auswertung der gesammelten Daten mit dem Excel-AddIn [http://www.winstat.de/ WinStat] | ||
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# Die Pollenprobe bzw. die Antheren auf einen Objektträger legen und je nach Menge Probenmaterial 2-4 Micro-Tropfen (Accumax 50 μm Micropipette) Acetolyse-Mischung auftropfen. | # Die Pollenprobe bzw. die Antheren auf einen Objektträger legen und je nach Menge Probenmaterial 2-4 Micro-Tropfen (Accumax 50 μm Micropipette) Acetolyse-Mischung auftropfen. | ||
# Die Antheren mit einer Präpariernadel etwas zerstückeln und in der Flüssigkeit einige Minuten einweichen lassen. Wenn nötig, nochmals | # Die Antheren mit einer Präpariernadel etwas zerstückeln und in der Flüssigkeit einige Minuten einweichen lassen. Wenn nötig, nochmals einigen Tropfen Acetolyse-Mischung zugeben. | ||
# Den Objektträger für eine kurze Zeit auf eine Heizplatte (ca. 90°C) legen. Das Probematerial wird zuerst leicht braun, dann braun-schwarz und wird glänzend oder bläht sich leicht auf. Zwischen diesen beiden Zuständen das Präparat von der Heizplatte nehmen. | # Den Objektträger für eine kurze Zeit auf eine Heizplatte (ca. 90°C) legen. Das Probematerial wird zuerst leicht braun, dann braun-schwarz und wird glänzend oder bläht sich leicht auf. Zwischen diesen beiden Zuständen das Präparat von der Heizplatte nehmen. | ||
# Die braune bis braunschwarze honigartige Flüssigkeit mit der Skalpellspitze zusammenkratzen und mit einer feinen Pinzette gröberes Material entfernen. | # Die braune bis braunschwarze honigartige Flüssigkeit mit der Skalpellspitze zusammenkratzen und mit einer feinen Pinzette gröberes Material entfernen. | ||
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= Einschluss- und Färbemittel, Chemikalien = | = Einschluss- und Färbemittel, Chemikalien = | ||
=== Acetolyse-Mischung === | === Acetolyse-Mischung === | ||
9 ml Essigsäureanhydrid (Acetanhydrid, Dichte 1.08 g/cm<sup>3</sup>, = 9.72 g) werden mit 1 ml konzentrierter Schwefelsäure (Dichte 1.83 g/cm<sup>3</sup>) gemischt. Achtung, diese Mischung ist sehr reaktiv. Unbedingt Schutzbrille und Handschuhe tragen. Die Lösung ist zu Beginn ganz leicht gelblich, wird mit der Zeit aber immer dunkler und verliert langsam | 9 ml Essigsäureanhydrid (Acetanhydrid, Dichte 1.08 g/cm<sup>3</sup>, = 9.72 g) werden mit 1 ml konzentrierter Schwefelsäure (Dichte 1.83 g/cm<sup>3</sup>) gemischt. Achtung, diese Mischung ist sehr reaktiv. Unbedingt Schutzbrille und Handschuhe tragen. Die Lösung ist zu Beginn ganz leicht gelblich, wird mit der Zeit aber immer dunkler und verliert langsam ihre Reaktivität. Im Kühlschrank aufbewahren. Siehe [[:Kategorie:TypAcetolyse|die passenden Bilder]] dazu. | ||
=== Carmin-Essigsäure (Acetocarmin, nach Romeis, zur Kernfärbung) === | === Carmin-Essigsäure (Acetocarmin, nach Romeis, zur Kernfärbung) === | ||
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=== Glyceringelatine nach Kaiser mit Fuchsin (0.007%) gefärbt. <small> Ab Präparat 09-100 Standard</small>=== | === Glyceringelatine nach Kaiser mit Fuchsin (0.007%) gefärbt. <small> Ab Präparat 09-100 Standard</small>=== | ||
14 g Gelatina alba Golddruck, 85.5 g Aqua purificata, 100 g Glycerin 85%, 0.5 g Phenol, 14 mg Fuchsin (C.I. 42510, z.B. Merck 1.15937)<br> | 14 g Gelatina alba Golddruck, 85.5 g Aqua purificata, 100 g Glycerin 85%, 0.5 g Phenol, 14 mg Fuchsin (C.I. 42510, z.B. Merck 1.15937)<br> | ||
Die Gelatine und das Fuchsin im Wasser und dem Glycerin 85% in einer Plastik-Spritzflasche auf dem Wasserbad bei ca. 60°C lösen. Phenol zugeben und schlierenfrei mischen. Solange im Wasserbad stehen lassen, bis sich alle Luftblasen an der Oberfläche gesammelt haben. Die Spritzflasche langsam drehen und in Silikon-Eiswürfelformen giessen. Nach dem Erkalten aus der Form nehmen, in Celophan einwickeln und in einem grossen Pulvisglas dicht verschlossen aufbewahren. Das Phenol verhindert die Schimmelbildung. Kann auch weggelassen werden. | Die Gelatine und das Fuchsin im Wasser und dem Glycerin 85% in einer Plastik-Spritzflasche auf dem Wasserbad bei ca. 60°C lösen. Phenol zugeben und schlierenfrei mischen. Solange im Wasserbad stehen lassen, bis sich alle Luftblasen an der Oberfläche gesammelt haben. Die Spritzflasche langsam drehen und in Silikon-Eiswürfelformen giessen. Nach dem Erkalten aus der Form nehmen, in Celophan einwickeln und in einem grossen Pulvisglas dicht verschlossen aufbewahren. Das Phenol verhindert die Schimmelbildung. Kann auch weggelassen werden.<br> | ||
Die Färbung mit Fuchsin ist pH-abhängig. Unten findet man die Farbverläufe. Erstellt mit der KI Copilot und Perplexity:<br> | |||
[[File:Farbverlauf Fuchsin Copilot.png|440px]] | |||
[[File:Farbverlauf Fuchsin Perplexity.png|440px]] | |||
=== Glyceringelatine nach Kisser === | === Glyceringelatine nach Kisser === | ||
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0.02 g Ruthenium-Rot in 100 ml Aqua purificata lösen. | 0.02 g Ruthenium-Rot in 100 ml Aqua purificata lösen. | ||
=== Ruthenium-Rot (0.02%) Glycerin-Gelatine === | === Ruthenium-Rot (ca. 0.02%) Glycerin-Gelatine === | ||
25.0 g Glycerin 85%, 21.4 g Wasser, 3.5 g Gelatine, 0.1 g Phenol, 0.01 g Ruthenium-Rot. | 25.0 g Glycerin 85%, 21.4 g Wasser, 3.5 g Gelatine, 0.1 g Phenol, 0.01 g Ruthenium-Rot. Herstellung wie bei Glyceringelatine. Giessen in Zäpfchenformen. | ||
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